ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಹೇಗೆ ನಿರ್ಧರಿಸುವುದು?
ಪ್ರಚೋದಕ IPTG (ಐಸೊಪ್ರೊಪಿಲ್-ಬೀಟಾ-ಡಿ-ಥಿಯೊಗಲಾಕ್ಟೊಸೈಡ್) ಗಾಗಿ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ಉತ್ತಮವಾಗಿರುತ್ತದೆ.ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾದ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು ಮತ್ತು ಅಪೇಕ್ಷಿತ ಇಂಡಕ್ಷನ್ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ.
ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, IPTG ಯ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು 0.1-1 mM ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಕಡಿಮೆ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ಜೀವಕೋಶದ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಮೇಲೆ ಪ್ರತಿಕೂಲ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಟಾರ್ಗೆಟ್ ಪ್ರೊಟೀನ್‌ಗಳ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದಿಂದಾಗಿ ಸೈಟೊಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳು ಜೀವಕೋಶದ ಬೆಳವಣಿಗೆ ಮತ್ತು ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ದಕ್ಷತೆಯ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವ ಅತಿಯಾದ ಜೀವಕೋಶದ ಚಯಾಪಚಯ ಹೊರೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು.
ವಿವಿಧ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಲ್ಲಿ IPTG ಇಂಡಕ್ಷನ್ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳನ್ನು ನಡೆಸುವ ಮೂಲಕ ಗುರಿ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡುವುದು ಸೂಕ್ತ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವ ಮಾರ್ಗವಾಗಿದೆ.ಸಣ್ಣ-ಪ್ರಮಾಣದ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳನ್ನು IPTG ಸಾಂದ್ರತೆಗಳ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ನಿರ್ವಹಿಸಬಹುದು (ಉದಾ 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM, ಇತ್ಯಾದಿ.) ಮತ್ತು ವಿವಿಧ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಲ್ಲಿನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಗುರಿ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯುವ ಮೂಲಕ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಬಹುದು (ಉದಾ. ಪಾಶ್ಚಿಮಾತ್ಯ). ಬ್ಲಾಟ್ ಅಥವಾ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಪತ್ತೆ).ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳ ಪ್ರಕಾರ, ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಸಾಂದ್ರತೆಯಾಗಿ ಆಯ್ಕೆಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ಇದೇ ರೀತಿಯ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ IPTG ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಶ್ರೇಣಿಯನ್ನು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು ನೀವು ಸಂಬಂಧಿತ ಸಾಹಿತ್ಯ ಅಥವಾ ಇತರ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳ ಅನುಭವವನ್ನು ಸಹ ಉಲ್ಲೇಖಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ನಂತರ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಅಗತ್ಯಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಉತ್ತಮಗೊಳಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಹೊಂದಿಸಬಹುದು.
ವಿಭಿನ್ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳು, ಗುರಿ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ ಸೂಕ್ತವಾದ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ಬದಲಾಗಬಹುದು ಎಂಬುದನ್ನು ಗಮನಿಸುವುದು ಮುಖ್ಯವಾಗಿದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಕೇಸ್-ಬೈ-ಕೇಸ್ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಉತ್ತಮಗೊಳಿಸುವುದು ಉತ್ತಮವಾಗಿದೆ.
ಪೋಸ್ಟ್ ಸಮಯ: ಸೆಪ್ಟೆಂಬರ್-28-2023