4-ನೈಟ್ರೋಫಿನೈಲ್ ಬೀಟಾ-ಡಿ-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಪಿರನೊಸೈಡ್ CAS:200422-18-0

ಪರಿಣಾಮ: ONPG ಎನ್ನುವುದು β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಕಿಣ್ವದ ಉಪಸ್ಥಿತಿ ಮತ್ತು ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಒಂದು ತಲಾಧಾರವಾಗಿದೆ. β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಕಿಣ್ವವು ಇದ್ದಾಗ ಮತ್ತು ಸಕ್ರಿಯವಾಗಿದ್ದಾಗ, ಅದು ONPG ಅನ್ನು ಎರಡು ಉತ್ಪನ್ನಗಳಾಗಿ ವಿಭಜಿಸುತ್ತದೆ: ಒ-ನೈಟ್ರೋಫಿನಾಲ್ ಮತ್ತು ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸ್ ಉತ್ಪನ್ನ. ಒ-ನೈಟ್ರೋಫಿನಾಲ್ ಬಿಡುಗಡೆಯು ಹಳದಿ ಬಣ್ಣ ಬದಲಾವಣೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ, ಇದನ್ನು ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೋಮೀಟರ್ ಬಳಸಿ ಅಳೆಯಬಹುದು.

ಅನ್ವಯ: ONPG ಆಣ್ವಿಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರ ಮತ್ತು ಜೀವರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರ ಸಂಶೋಧನೆಯಲ್ಲಿ ಹಲವಾರು ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ:

β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ನಿರ್ಣಯ: ONPG ಅನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಕಿಣ್ವದ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಅಳೆಯಲು ಮತ್ತು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕಿಣ್ವ ಚಟುವಟಿಕೆಗೆ ನೇರವಾಗಿ ಅನುಪಾತದಲ್ಲಿರುವ ಒ-ನೈಟ್ರೋಫಿನಾಲ್ ರಚನೆಯ ದರವನ್ನು ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೋಮೆಟ್ರಿಕ್ ಮೂಲಕ ಅಳೆಯಬಹುದು.

ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ನಿಯಂತ್ರಣ: ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ನಿಯಂತ್ರಣ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ONPG ಅನ್ನು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರವರ್ತಕಗಳ ನಿಯಂತ್ರಣದಲ್ಲಿರುವ ಜೀನ್‌ಗಳ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ಲ್ಯಾಕ್‌ಝಡ್ ಸಮ್ಮಿಳನ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಂತಹ ಸಮ್ಮಿಳನ ಪ್ರೋಟೀನ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳಲ್ಲಿ ಇದನ್ನು ಆಗಾಗ್ಗೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ONPG ಬಳಸಿ ಅಳೆಯಲಾದ ಬೀಟಾ-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಮಟ್ಟದ ಒಳನೋಟಗಳನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ.

β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಗಾಗಿ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್: β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಅನ್ನು ಎನ್ಕೋಡ್ ಮಾಡುವ ಲ್ಯಾಕ್‌ಝಡ್ ಜೀನ್‌ನ ಉಪಸ್ಥಿತಿ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯವನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಪುನರ್ಸಂಯೋಜಿತ ಡಿಎನ್‌ಎ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದಲ್ಲಿ ONPG ಅನ್ನು ವರ್ಣಮಾಪನ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ವಿಧಾನವಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು. ಈ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ವಿಧಾನವು ಆಸಕ್ತಿಯ ಜೀನ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಕ್ಲೋನ್‌ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ.

ಕಿಣ್ವ ಚಲನಶಾಸ್ತ್ರದ ಅಧ್ಯಯನಗಳು: ONPG ಯು β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಕಿಣ್ವದ ಚಲನಶಾಸ್ತ್ರವನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಸಹ ಉಪಯುಕ್ತವಾಗಿದೆ. ವಿಭಿನ್ನ ತಲಾಧಾರ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಲ್ಲಿ ಕಿಣ್ವ-ತಲಾಧಾರ ಕ್ರಿಯೆಯ ದರವನ್ನು ಅಳೆಯುವ ಮೂಲಕ, ಮೈಕೆಲಿಸ್-ಮೆಂಟೆನ್ ಸ್ಥಿರಾಂಕಗಳು (Km) ಮತ್ತು ಗರಿಷ್ಠ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ದರಗಳು (Vmax) ನಂತಹ ಚಲನಶಾಸ್ತ್ರದ ನಿಯತಾಂಕಗಳನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿದೆ.